摘要：建立测定丁溴东莨菪碱有关物质的高效液相色谱法。方法：采用WatersSymmetryC18
色谱柱，以0.001mol*L-1盐酸-甲醇(185∶340)配制的0.008mol*L-1十二烷基硫酸钠溶液为活动相，用DAD检测器于210nm波优点测定。
丁溴东莨菪碱为抗胆碱药。生产本品的原料为托烷类生物碱，生产中的主要杂质为氢溴酸东莨菪碱。
中国药典1995年版、BP1993年版、日本药局方(十二改正)均收载了该品种［1～3］。
中国药典1995年版采用了TLC法检查有关物质，但分离情况并不理想，主斑点拖尾现象较严重，与杂质斑点分离度欠佳。本文参照BP1993年版进行试验研究，拟用HPLC法检查有关物质，用外标法测定氢溴酸东莨菪碱，面积回一化法检测总杂质量［4］。建立的HPLC法能使丁溴东莨菪碱与其他莨菪碱峰得到满足的分离，并对氢溴酸东莨菪碱进行了限量检查，操纵简便、快速、正确。
1仪器与试药
日本岛津UV-260型分光光度计，HP1100液相色谱仪，二极管阵列检测器。氢溴酸东莨菪碱
对照品、丁溴东莨菪碱
对照品和硫酸阿托品
对照品由中国药品生物制品检定所提供；样品：丁溴东莨菪碱原料由成都市制药一厂提供，水为超纯水，甲醇为
色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2实验方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：WatersSymmetryC18(5μm,3.9mm×150mm);柱温：30℃；理论板数按丁溴东莨菪碱峰计，应不低于3000；活动相：0.001mol*L-1盐酸-甲醇(185∶340)配制的0.008mol*L-1十二烷基硫酸钠溶液；流速：1.2mL*min-1；检测波长：210nm;进样量：10μL。
2.2检测波长的确定取丁溴东莨菪碱
对照品适量，分别加活动相、甲醇溶解，于190～700nm波长范围内进行扫描，在200及205nm波优点有吸收。BP1993年版在210nm波优点测定本品的有关物质。根据溶剂的紫外截止极限波长和参考BP1993年版规定，选择210nm作为检测波长。
2.3活动相的确定以氢溴酸东莨菪碱
对照品、丁溴东莨菪碱
对照品和硫酸阿托品
对照品(其他阿扑类化合物)的分离度为指标。经试验，采用0.001mol*L-1盐酸-甲醇(185∶340)配制的0.008mol*L-1十二烷基硫酸钠溶液为活动相；流速为1.2mL*min-1时，氢溴东莨菪碱峰与硫酸阿托品峰分离度为2.1；丁溴东莨菪碱峰与硫酸阿托品峰分离度为9.3，各峰均能得到完全分离。
1.溴离子(0.8min)2.氢溴酸东莨菪碱
对照品(6.1min)
2.4空缺试验取用活动相制成的空缺溶液，照“有关物质测定法”，进样，结果色谱图上无色谱峰。
2.5最低检测限取氢溴酸东莨菪碱
对照品，精密称定，用活动相制成每1mL中约含1.99μg的溶液，进样10μL，记录色谱图，以S/N=3∶1计算，最低检出限为19.9ng。
2.6回收实验以测定丁溴东莨菪碱的主要杂质氢溴酸东莨菪碱的回收率进行方法回收考察。精密称取丁溴东莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱
对照品适量，加活动相制成每1mL中各含0.1mg的混合溶液作为供试品溶液，另取氢溴酸东莨菪碱
对照品适量，精密称定，加活动相制成每1mL含0.1mg的溶液作为
对照品溶液，进样，氢溴酸东莨菪碱均匀回收率为99.6%(n=5)，RSD为0.55%。
2.7有关物质测定法取氢溴酸东莨菪碱
对照品适量，精密称定，加流动相制成每1mL中含0.05mg的溶液，作为
对照品溶液。取本品加活动相制成每1mL中含2.5mg的溶液，作为供试品溶液。量取供试品溶液适量，加活动相稀释成每1mL中含0.005mg的溶液，作为预试溶液。取预试溶液10μL注进液相色谱仪，调整仪器灵敏度，使主成分色谱峰的峰高度为满量程的20%～25%；再取
对照品溶液和供试品溶液各10μL，分别注进液相色谱仪，记录色谱图至供试品溶液主成分峰保存时间的2倍。氢溴酸东莨菪碱按外标法计算，应不得大于0.4%；各杂质峰(除往溶剂四周的溴离子峰)面积的总和应不得大于总峰面积的0.8%。
2.8样品中有关物质的测定结果按拟定方法测定丁溴东莨菪碱3批。
表13批样品有关物质检查的结果(%)
批号氢溴酸东莨菪碱总杂质
9711010.240.24
9711020.230.23
9711030.240.24
1.溴离子(0.8min)2.氢溴酸东莨菪碱
对照品(6.1min)
